Определение интенсивности фотосинтеза газометрическим методом (по Бабушкину Л.).
Интенсивность фотосинтеза выражает количество поглощенного СО2 (мг) или выделенного Ch (мг) в единицу времени (час) на единицу площади листовой поверхности (дм).
Интенсивность фотосинтеза зависит от освещенности, температуры воздуха, содержания СО2 и О2 и т.д. В течение дня могут наблюдаться 2 - 3 максимума интенсивности фотосинтеза. Интенсивность фотосинтеза увеличивается одновременно с увеличением концентрации СО2 и проходит в оптимальных условиях, когда лист содержит 86% воды. В условиях засухи интенсивность фотосинтеза снижается на 80-90%. Недостаток минеральных элементов также резко снижает интенсивность фотосинтеза.
Интенсивность фотосинтеза может быть определена по количеству накопленного сухого вещества, однако самый распространенный метод состоит в определении количества поглощенного СО2.
Процесс этот основывается на использовании буферных растворов Варбурга, способных поддерживать над раствором определенную концентрацию СО2.
Для определения интенсивности фотосинтеза применяется прибор, предложенный Л. H, Бабушкиным (рисунок 8).
Ход работы
На две колбы объемом 100 мл (контрольная и опытная) надеть белые чехлы из бумаги для предохранения системы от нагревания, прилить в каждую по 20 мл буферного раствора (1,5 Na2CО3 + 14 NaHCО3 на 1000 мл воды). Контрольную колбу закрыть резиновой пробкой, на опытную надеть зажим Бабушкина, между кольцами которого помещен лист исследуемого растения (нижней стороной лист направлен внутрь колбы). Опыт проводится в двух повторностях (т.е. на одном растении ставят опыт дважды).
Рисунок. Установка для определения интенсивности фотосинтеза (по Бабушкину Л.).
Контрольная колба стоит рядом с опытной, т.е. находится в тех же условиях. Экспозиция - 1 час. При этом СО2 из буферного раствора поглощается листом для осуществления процесса фотосинтеза.
После экспозиции слить обе контрольные колбы в одну и обе опытные колбы в одну (установление средней пробы). В обе колбы прибавить по 7 мл 0,025 н раствора НС1. Определить оптическую плотность контрольного и опытного растворов по исходному буферу на ФЭКе. По найденным оптическим плотностям найти на калибровочной кривой концентрацию СО2 в опытной (а) и контрольной (б) колбах.
где:
а - концентрация СО2 в опытной колбе;
b - концентрация СО2 в контрольной колбе;
t - время опыта, в часах;
13,8 - площадь отверстия насадки зажима Бабушкина, в дм2.
При колориметрировании используется зеленый светофильтр и кювета на 20 мл (рисунок, Д-520-530 нм).
Оборудование и реактивы:
- Зажим Бабушкина,
- колбы на 100 мл с пробками в чехлах (внизу черный, сверху белый),
- дозатор,
- пипетка на 5 мл,
- ФЭК-М,
- буферный раствор,
- НСI 0,025 н,
- фенолфталеин 1%.
Вопросы для повторения:
- Как определить интенсивность фотосинтеза?
- Какие факторы влияют на интенсивность фотосинтеза?
- У каких растений более интенсивный фотосинтез: С3 типа или С4?