Построение калибровочной кривой для количественного определения белка по биурету.

Ход работы

В шесть пробирок ввести соответствующий объем жидкости, указанный в таблице, постоянно взбалтывая раствор. По истечении 30 мин. определить оптическую плотность на КФК - 3 при длине волны 540 нм. Полученные результаты используют для построения калибровочной кривой: на оси абсцисс отмечают содержание белка (мг/мл), на оси ординат - оптическую плотность.

Количество

Диет, во

Реактив

Содержание

Оптическая

 

белковой

да

биурет

 

 

 

смеси St

(мл)

(мл)

белка

плотность

 

(мл)

 

 

(мг/мл)

 

1

0,2

0.8

4

2

 

2

0,4

0,6

4

4

 

3

0,6

0,4

4

6

 

4

0,8

0,2

4

8

 

5

1,0

0,0

4

10

 

6

0 (контр.)

1,0

4

0

             

 

Оборудование и реактивы:

  • КФК - 3;
  • штатив с пробирками;
  • пипетки градуированные на 1-2 мл; микробюретки;
  • баллон с кислотой на 11;

смери: 10% гидроокись Na, которая не содержит карбоната Na (75% смесь гидроокиси Na, в ней карбонаты не растворяются, растворяется дистиллированной водой до 10% концентрации), реактив биурет (к 250 г дистиллированной воды добавляют 0,75 г сульфата меди и 3 г сегнетовой соли - нитрат Na - К, затем хорошо взбалтывают и добавляют 150 мл 10%, смеси гидроокиси Na и 1г йода га К. Объем доводят дистиллированной водой до И. Реактив содержится в полиэтиленовом, сосуде), стандартная смесь содержит 10 мг белка в 1 мл.. 

Поделиться:
Добавить комментарий